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红皮型银屑病baidutieba 红皮型银屑病症状

小方方7个月前 (04-09)皮肤问答77

AAV在眼部注射方法有哪些

1、肺部注射包括鼻内滴注法和气管插管术。鼻内滴注法操作简单,直接将病毒悬液滴入鼻腔,但颗粒可能沉积在上呼吸道,需要较大剂量的病毒。气管插管术能将病毒载体直接输入肺部,避免上呼吸道损失,但需特殊设备和技巧。此外,还有气管内注射,操作与鼻内滴注法类似,但直接注入气管。

2、麻醉小鼠,确保其对疼痛刺激无反应。2) 保护小鼠眼睛,保持湿润并抑制眨眼反射。3) 保持小鼠体温,防止麻醉后过低。4) 清洁小鼠耳朵,并消毒。5) 打开鼓室大疱,暴露镫骨动脉和圆窗膜。6) 轻轻在圆窗膜中心穿刺,观察液体流出。7) 将0.6~2μL的AAV载体注射至耳蜗鼓阶。

3、AAV因其特异性而成为首选载体,不同血清型针对特定组织有较高感染能力,通过合适注射方法可实现体内特异性表达。实现特异性表达的方法包括选择组织特异性血清型、使用细胞特异性启动子以及局部注射等。

4、最后,AAV的注射方式包括脑立体定位、脑室注射等,这些方法能够实现基因在特定神经区域的精确表达。以脑立体定位为例,如图9所示,通过AAV9结合CamKIIα特异性启动子在小鼠海马区进行注射,可以实现基因在兴奋性神经元的特异性表达。

5、首先,对实验动物进行称重和麻醉,确保动物处于完全麻醉状态。 然后,清理动物头顶眼睛至耳朵之间区域的毛发,确保注射区域的清洁与无干扰。 将麻醉后的动物固定于脑立体定位仪上,确保头部固定,鼻对中线,头部不动,提尾不掉,大脑放置水平。 手术过程中,消毒清理动物头皮,暴露颅骨表面。

6、圆窗膜(RWM)注射方法,适用于新生小鼠和非人灵长类动物,载体可传送至耳蜗鼓阶的外淋巴。此方法对内耳外毛细胞转导率相对有限。具体操作包括麻醉小鼠,消毒耳朵,切开皮肤露出鼓室大疱,然后在大疱上穿孔,使用移液管在RWM中心轻轻穿刺,注入0.6~2μL的AAV载体,封孔并缝合伤口。

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